https://repositorioinstitucional.uaslp.mx/xmlui/handle/i/5041 Fri, 21 Aug 2026 04:35:02 GMT 2026-08-21T04:35:02Z https://repositorioinstitucional.uaslp.mx/xmlui/handle/i/10060 Evaluación de los componentes del Sistema Renina-Angiotensina (RAS) en leucocitos de pacientes con DMT2 Ortiz Jiménez, Anahí Introducción. La diabetes mellitus tipo 2 (DMT2) presenta distintas alteraciones metabólicas que favorecen el desarrollo de hiperglucemia. El estado de control glucémico representa uno de los determinantes de la progresión de la enfermedad, ya que la hiperglucemia favorece la activación de vías relacionadas con el daño celular. Entre las células involucradas se encuentran los monocitos clásicos (CD14+ CD16-), que expresan localmente la enzima convertidora de angiotensina (ACE), cuya activación conduce a la generación de angiotensina II (Ang II), la cual ejerce una respuesta inflamatoria y a su vez, contribuye al estado de inflamación crónica de bajo grado característico de la DMT2, que, en conjunto con otras alteraciones, favorece el desarrollo y progresión de la enfermedad. Objetivo. Evaluar la expresión y la actividad de la ACE en monocitos clásicos de individuos sanos y pacientes con DMT2 clasificados según su control glucémico. Metodología. Se realizó un estudio observacional, analítico, comparativo y de corte transversal con tres grupos: individuos sanos y pacientes con DMT2 clasificados de acuerdo a su control glucémico. Se evaluó el porcentaje de monocitos clásicos ACE+ por FACS. Posteriormente, los monocitos clásicos se aislaron por separación inmunomagnética y se evaluó la actividad de ACE mediante la incubación con angiotensina I (Ang I), cuantificando la producción de Ang II mediante ELISA. Se determinó la expresión génica de ACE, AT1R y MasR mediante RT-qPCR. Resultados. Los pacientes con DMT2 mostraron un mayor porcentaje de monocitos clásicos ACE+ (p=0.0306), además de un incremento de la actividad de la enzima, evidenciado por una mayor producción de Ang II, principalmente en los pacientes con DMT2 con control glucémico inadecuado (p=0.0416). Por otro lado, los pacientes con DMT2 presentaron una disminución en la expresión génica relativa de ACE (p=0.0217) y un incremento en la expresión de MasR (p=0.0245); mientras que la expresión de AT1R no mostró diferencias entre los grupos. Conclusión. La DMT2 se asocia con un incremento en la participación del eje proinflamatorio ACE/Ang II, así como la activación de un mecanismo compensatorio caracterizado por el incremento de MasR a nivel génico.; Introduction. Type 2 Diabetes Mellitus is characterized by metabolic alterations, that promoted the development of chronic hyperglycemia. Glycemic control is one of the main determinants of disease progression, as prolonged hyperglycemia promotes the activation of signaling pathways associated with cellular damage and inflammation. Among the immune cells involved in these processes are classical monocytes (CD14++ CD16-), wich play a key role due to their migratory capacity and early participation in the inflammatory response. These cells locally express Angiotensin-Converting Enzyme (ACE), which catalyzes the conversion of Ang I into Ang II. Through activation of its receptor promote a proinflammatory response that contribute the chronic low grade inflammatory state characteristic of T2D, together with other metabolic alterations, favor to disease development and progression. Objective. To evaluate the expression and activity of ACE in classical monocytes (CD14++, CD16-) from healthy controls and patients with T2D with different levels of glycemic control. Methods. A comparative study was conducted including three groups: healthy individuals and patients with T2D classified according to adequate or inadequate glycemic control. The percentage of ACE+ classical monocytes was evaluated by flow cytometry. Classical monocytes were isolated using a Miltenyi Biotec Kit, by immunomagnetic separation based in negative selection and ACE functional activity was assessed by culturing classical monocytes with the Ang I peptide and subsequently quantifying Ang II production by ELISA. In addition, the relative gene expression of ACE, AT1R and MasR was determined by RT-qPCR- Results. Patients with T2D exhibited increased ACE protein expression, as well as increased ACE activity, particularly in those with inadequate glycemic control. In contrast, patients with T2D showed a significant decrease in ACE gene expression and an increase MasR gene expression. Conclusion. T2DM is associated with increased to the participation of the proinflammatory ACE/Ang II axis, as well as the activation of a compensatory mechanism characterized by increased MasR gene expression. Mon, 17 Aug 2026 00:00:00 GMT https://repositorioinstitucional.uaslp.mx/xmlui/handle/i/10060 2026-08-17T00:00:00Z https://repositorioinstitucional.uaslp.mx/xmlui/handle/i/10038 Evaluación del impacto de las plaquetas en la formación de macrófagos espumosos durante la infección de Mycobacterium tuberculosis Tovar Nieto, Andrea Michel La tuberculosis (TB) prevalece como un problema de salud global. Uno de los mecanismos que favorecen la persistencia del bacilo es la formación de macrófagos espumosos dentro de los granulomas. Sin embargo, se desconoce si las plaquetas participan en el proceso de generación de estas células. En este proyecto se realizó un estudio experimental controlado para evaluar el impacto que tienen las plaquetas en la diferenciación de los monocitos hacia un fenotipo tipo espumoso y su papel durante la infección de Mycobacterium tuberculosis (Mtb). Para lograr este objetivo se aisló monocitos y plaquetas de sangre periférica de donantes sanos y mediante cultivos de monocitos con plaquetas se observó características típicas de los macrófagos espumosos: los monocitos desarrollaron abundantes gotas lipídicas intracelulares, aumento del tamaño celular, morfología irregular y desplazamiento nuclear. La presencia de plaquetas incrementó significativamente la formación de estas células. Los macrófagos espumosos inducidos sobre expresaron genes clave del metabolismo lipídico, como CD36 y PPARγ. Al infectarlos con Mtb, presentaron un perfil de citocinas con disminución en las proinflamatorias y aumento de las antiinflamatorias. Además, mostraron una mayor capacidad para controlar el crecimiento intracelular del bacilo. En conjunto, la interacción plaqueta-monocito genera macrófagos espumosos con un perfil metabólico e inmunológico alterado que, limita la replicación bacteriana, abriendo nuevas perspectivas en la inmunopatología de la tuberculosis.; Tuberculosis (TB) remains a global health problem. One of the mechanisms that favors bacillus persistence is the formation of foam macrophages within granulomas. However, it is unknown whether platelets participate in the process of generating these cells. In this project, a controlled experimental study was conducted to evaluate the impact of platelets on monocyte differentiation toward a foam-like phenotype and their role during Mycobacterium tuberculosis (Mtb) infection. To achieve this objective, monocytes and platelets were isolated from peripheral blood of healthy donors, and through monocyte cultures with platelets, typical characteristics of foamy macrophages were observed: the monocytes developed abundant intracellular lipid droplets, increased cell size, irregular morphology, and nuclear displacement. The presence of platelets significantly increased the formation of these cells. The induced foam macrophages overexpressed key lipid metabolism genes, such as CD36 and PPARγ. When infected with Mtb, they exhibited a cytokine profile with decreased proinflammatory and increased anti-inflammatory cytokines. Furthermore, they showed an enhanced capacity to control intracellular bacillus growth of the bacillus. Altogether, the platelet-monocyte interaction generates foam macrophages with an altered metabolic and immunological profile that limits bacterial replication, opening new perspectives in the immunopathology of tuberculosis. Tue, 14 Jul 2026 00:00:00 GMT https://repositorioinstitucional.uaslp.mx/xmlui/handle/i/10038 2026-07-14T00:00:00Z https://repositorioinstitucional.uaslp.mx/xmlui/handle/i/9917 Dosificación de Precisión de Ácido Micofenólico a partir de un modelo farmacocinético poblacional en pacientes con nefritis lúpica Rodríguez Aquino, Edgar de Jesús El Micofenolato de mofetilo (MMF) profármaco del Ácido Micofenólico (MPA), es un fármaco inmunosupresor utilizado para tratar la nefritis lúpica (NL), una de las complicaciones más importantes en los pacientes con lupus eritematoso sistémico. Sin embargo, el tratamiento con este fármaco se caracteriza por una alta variabilidad farmacocinética interindividual. Entre los factores que contribuyen a esta variabilidad se encuentran la disfunción renal y la hipoalbuminemia, los cuales se asocian con niveles plasmáticos más bajos de MPA provocando una mala respuesta al tratamiento. Se ha demostrado previamente que la aplicación de regímenes de dosificación diseñados a partir de modelos poblacionales que consideren las características individuales de cada uno de los pacientes disminuye considerablemente la variabilidad farmacocinética del MPA, aumentado la probabilidad de alcanzar el objetivo terapéutico. En este trabajo, se realizó la dosificación de precisión de MMF a partir de estimación bayesiana para evaluar la respuesta al tratamiento farmacológico. Para lo anterior, se optimizó y validó un método por UPLC-MS/MS para la cuantificación de MPA en plasma y se estableció una estrategia de muestreo limitado considerando la concentración plasmática pre-dosis y 2 horas post-dosis, para estimar el ABC0-12h mediante simulaciones estocásticas. Se realizó un estudio clínico piloto en 30 pacientes con NL para cuantificar las concentraciones plasmáticas de MPA y se observó una amplia variabilidad interindividual en la exposición al MPA, con una proporción importante fuera del rango terapéutico, especialmente en aquellos con enfermedad activa. La individualización de la dosis de MMF, basada en un modelo farmacocinético poblacional de MPA, permitió proponer ajustes de dosificación personalizados. Además, durante el seguimiento clínico de un subgrupo de pacientes, la reducción significativa de la dosis y concentraciones plasmáticas se asoció con un aumento en el aclaramiento de creatinina, lo que respalda la utilidad clínica de la cuantificación de los niveles plasmáticos de MPA.; Mycophenolate mofetil (MMF), a prodrug of mycophenolic acid (MPA), is an immunosuppressive agent widely used in the treatment of lupus nephritis (LN), one of the most significant complications in patients with systemic lupus erythematosus. However, therapy with this drug is characterized by substantial interindividual pharmacokinetic variability. Among the factors contributing to this variability are renal disfunction and hypoalbuminemia, both of which are associated with lower plasma concentrations of MPA and, consequently a poorer therapeutic response. It has been previously demonstrated tant applying dosing regimens designed from population models that consider the individual characteristics of each patient considerably reduces the pharmacokinetic variability of MPA, ensuring the therapeutic target. In this study, precision dosing of MMF was performed using Bayesian estimation to evaluate the response to pharmacological treatment. A UPLC-MS/MS method for quantifying MPA in plasma was optimized and validated. Additionally, a limited sampling strategy was established, incorporating pre-dose and 2-hour post-dose plasma concentrations to estimate AUC0-12h through stochastic simulations. A pilot clinical study was conducted in 30 patients with LN to quantify plasma concentrations of MPA. A wide interindividual variability in MPA exposure was observed, with a significant proportion outside the therapeutic range, especially in those with active diseases. Individualization of the MMF dose based on population model of MPA, enabled the proposal of personalized dosing adjustments. Furthermore, during the clinical follow-up of a subgroup of patients, a significant reduction in dose and plasma concentrations was associated with an increase in creatinine clearance, supporting the clinical utility of monitoring plasma MPA levels. Tue, 21 Apr 2026 00:00:00 GMT https://repositorioinstitucional.uaslp.mx/xmlui/handle/i/9917 2026-04-21T00:00:00Z https://repositorioinstitucional.uaslp.mx/xmlui/handle/i/9817 Producción y caracterización de antígenos del SARS-CoV-2 empleando el fragmento C de la toxina de tétanos como acarreador Escudero Pozos, Hebert La pandemia causada por el SARS-CoV-2 ha representado uno de los mayores desafíos sanitarios a nivel global en las últimas décadas. Las vacunas basadas en proteínas multiepitópicas representan una estrategia para combatir a los patógenos virales debido a que su diseño racional puede permitir alcanzar una alta eficacia y seguridad a la vez que se pueden adaptar fácilmente a nuevas variantes. En este trabajo se diseñó, produjo y evaluó una proteína multiepitópica llamada TTC-mep, basada en epítopos de la proteína Spike de SARS-CoV-2, que se fusionaron al fragmento C de la toxina tetánica (TTC) como acarreador inmunogénico. Se empleó Escherichia coli como sistema de expresión para TTC-mep, evaluando diferentes condiciones de inducción para optimizar la expresión, se analizó la solubilidad del antígeno y se implementaron estrategias de purificación por cromatografía de afinidad a metales inmovilizados (IMAC). La identidad de la TTC-mep se confirmó mediante análisis electroforéticos de inmunodetección. Finalmente, la inmunogenicidad de TTC-mep fue evaluada en ratones BALB/c, lo que permitió probar la inducción de anticuerpos específicos para TTC-mep y al TTC; sin embargo, la respuesta humoral frente a la proteína Spike fue limitada, lo que sugiere que el plegamiento y la conformación estructural del antígeno debe ser optimizado en estudios posteriores. Este estudio demuestra la viabilidad de una plataforma bacteriana para la producción de proteínas multiepitópicas y establece un marco metodológico para la optimización futura del diseño antigénico, con potencial aplicación en el desarrollo de vacunas frente a SARS-CoV-2 y otros patógenos emergentes de relevancia en salud pública.; The pandemic caused by SARS-CoV-2 has represented one of the greatest global public health challenges in recent decades. Multiepitope protein-based vaccines represent a promising strategy to combat viral pathogens, as their rational design can achieve high efficacy and safety while allowing rapid adaptation to emerging variants. In this study, a multiepitope protein named TTC-mep was designed, produced, and evaluated. TTC-mep is based on epitopes derived from the SARS-CoV-2 Spike protein fused to the tetanus toxin C-fragment (TTC) as an immunogenic carrier. Escherichia coli was employed as the expression system for TTC-mep, and different induction conditions were evaluated to optimize protein expression. Antigen solubility was analyzed, and purification strategies based on immobilized metal affinity chromatography (IMAC) were implemented. The identity of TTC-mep was confirmed by immunodetectionbased electrophoretic analyses. Finally, the immunogenicity of TTC-mep was evaluated in BALB/c mice, demonstrating the induction of specific antibodies against TTCmep and TTC; however, the humoral response against the Spike protein was limited, suggesting that antigen folding and structural conformation should be optimized in future studies. This work demonstrates the feasibility of a bacterial platform for the production of multiepitope proteins and establishes a methodological framework for further optimization of antigen design, with potential application in the development of vaccines against SARS-CoV-2 and other emerging pathogens of public health relevance. Fri, 27 Feb 2026 00:00:00 GMT https://repositorioinstitucional.uaslp.mx/xmlui/handle/i/9817 2026-02-27T00:00:00Z