Evaluación de HIF-1α y actividad mitocondrial en linfocitos T CD8+PD1+ y monocitos CD14+IRF8+ con fenotipo de agotamiento en pacientes con cáncer de mama

Abstract

Introducción: El cáncer de mama es un problema de salud mundial, y continúan los estudios para generar información relacionada con su pronóstico, diagnóstico y tratamiento. El microambiente tumoral tiene como característica generar hipoxia lo que afecta la actividad mitocondrial y el proceso de agotamiento de las células inmunes. En condiciones de hipoxia, HIF-1α promueve un metabolismo glucolítico y se genera un aumento en el agotamiento de linfocitos T CD8+PD-1+ y monocitos CD14+IRF8+ favoreciendo una respuesta protumoral. Por lo tanto, los mecanismos de regulación de HIF-1α tendrán un efecto en la actividad mitocondrial de estas células y en consecuencia en la respuesta inmune. Objetivo: Evaluar los niveles de HIF-1α y la actividad mitocondrial en linfocitos y monocitos con marcadores de agotamiento en pacientes con cáncer de mama y controles sanos. Metodología: Se incluyeron a 13 pacientes con diagnóstico de cáncer de mama del Hospital Central Dr. Ignacio Morones Prieto y 13 sujetos sanos como grupo control. Se evaluaron los niveles de HIF-1α y la masa mitocondrial en linfocitos T CD8+PD-1+ y monocitos CD14+IRF8+ de sangre periférica mediante citometría de flujo. Además, se analizó la actividad metabólica y la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS). Los cultivos fueron estimulados con CoCl2, LPS y aCD3/aCD28; los datos se analizaron a través de los softwares FlowJo V.10.9.0, GraphPad Prism 8 y R versión 4.3.2. Resultados: Se demostró un aumento de PD-1 en linfocitos T CD8+ de pacientes al ser estimulados con aCD3/aCD28. Así mismo, se observó un aumento en la actividad metabólica de estas células en comparación con las células no estimuladas. Se detectó en los monocitos CD14+IRF8+ un incremento en la intensidad media de fluorescencia de HIF-1α al ser estimulados con LPS y CoCl2 durante 24 horas. Aunque no hubo diferencias en la masa mitocondrial, las células estimuladas con CoCl2 (24h, 5%CO2) mostraron una mayor actividad metabólica (p<0.05) y mayores niveles de ROS en pacientes con cáncer. Por otro lado, se observó una tendencia a expresar mayor porcentaje de células HIF-1α+ en los monocitos CD14+IRF8+ de pacientes con diferentes grados tumorales. Conclusión: Este estudio describe la estabilización de HIF-1α en linfocitos T CD8+PD-1+ y monocitos CD14+IRF8+ de pacientes con cáncer de mama mediante mecanismos dependientes e independientes de oxígeno, característicos del microambiente tumoral (TME). Se observó una mayor estabilización de HIF-1α por estimulación antigénica en tumores de mal pronóstico. Además, se encontró una correlación entre HIF-1α, la producción de ROS y defectos en la actividad mitocondrial, lo que favorece el agotamiento inmune y la evasión tumoral. Estos hallazgos sugieren que el bloqueo de HIF-1α podría ser una estrategia terapéutica para el cáncer de mama.